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土壤脂肪酶(SLPS)測(cè)試盒

簡(jiǎn)要描述:土壤脂肪酶(SLPS)測(cè)試盒 土壤脂肪酶(Solid-Lipase,S-LPS)活性試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品.為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開(kāi)發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-05-07
  • 訪  問(wèn)  量:300

詳細(xì)介紹

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土壤脂肪酶(SLPS)測(cè)試盒

微量法100/96S

注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

LPS又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。

測(cè)定原理:

LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算LPS活性。

自備儀器和用品:

研缽、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、甲苯80mL、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體65mL×2瓶,4℃保存。

試劑二:液體10mL×1瓶,4℃保存。每次使用前用震蕩混勻器劇烈震蕩20min。

試劑三:甲苯80mL×1瓶,4℃保存(自備)。

試劑四:液體10mL×1瓶,4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體10 μL×1瓶,10 µmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,4℃保存。臨用前加入3.168 mL甲苯,充分溶解。

樣本處理

建議稱取約0.1g土樣,加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿,再用回旋式振蕩器振蕩提取15min,4℃,4000g離心10min,取上清待測(cè)。

S-LPS測(cè)定操作:

  1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到710 nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 試劑一和試劑二置于37℃水浴預(yù)熱30min。

  3. 在1.5mL EP管中依次加入下列試劑

試劑名稱(μL)

空白管

測(cè)定管

蒸餾水

150


樣本


50

試劑一

300

300

試劑二


100

                   37℃振蕩反應(yīng)10 min

試劑三

800

800

        37℃振蕩反應(yīng)10 min后,8000g,25℃,離心10min,取上清液

試劑名稱(μL)

空白管

測(cè)定管

標(biāo)準(zhǔn)管

上清液

400

400


標(biāo)準(zhǔn)品



400

試劑四

100

100

100

               37℃振蕩反應(yīng)5 min后,靜置5min,取200μL上層液加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm處測(cè)定吸光值。


注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。


S-LPS活性計(jì)算公式:

活性單位定義:37℃中每克土樣每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個(gè)酶活單位。

S-LPS (μmol/min/g 土樣) = [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管)]×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=16×[(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管)]÷W

C標(biāo)準(zhǔn)品:10 µmol/mL;V反總:反應(yīng)總體積,0.8mL;V樣:反應(yīng)中加入樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL; W:樣本質(zhì)量,g;T:催化反應(yīng)時(shí)間,10 min。






上海牧榮生物科技有限公司

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土壤脂肪酶(SLPS)測(cè)試盒







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